EcoRⅠ是一种来源于大肠杆菌的II型限制性内切酶 ，能特异性识别双链DNA中的6碱基回文序列5′-GAATTC-3′并在特定位置切割，产生5′端突出的黏性末端 。该酶于20世纪70年代初被发现 ，是首批被发现的限制性内切酶之一 。
1973年，Cohen等人利用EcoRⅠ酶切片段构建重组质粒，开启了重组DNA技术的历史 。该技术因其能精准切割和连接DNA而被称为"生物手术刀"，成为遗传工程（基因工程）的骨干技术体系 。
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