虎红平板凝集试验

虎红平板凝集试验

虎红平板凝集试验(RBT)是布鲁氏菌病(布病)血清学检测的初筛实验,通过检测血清中的IgG类抗体进行诊断 。1969年由Morgan氏最先应用于人布氏杆菌病的血清学诊断 。试验原理为使用酸性带色抗原抑制IgM类抗体活性,特异性识别IgG类抗体 ,抗原为经虎红染色并在pH3.65±0.05下缓冲的灭活布鲁氏菌悬液。操作时在洁净玻片滴加25-30μL待检血清与等量抗原混合,4分钟内观察凝集反应,出现肉眼可见凝集为阳性 。假阳性反应可能由疫苗接种后的残留抗体活性、犊牛初乳抗体、与某些细菌(如小肠结肠炎耶尔森菌)的交叉反应及实验室误差引起;假阴性反应可能出现在疾病早期潜伏期和流产后 。1982年,成功开发布病虎红平板凝集试验方法及抗原制备方法 。该方法需与试管凝集试验(SAT)联合应用,SAT作为确诊实验通过系列稀释和温育判定结果,阳性标准为1:100 ++及以上 。在实际检测中,实验室需依据《布鲁氏菌病诊断》(WS269-2019)进行操作 。在感染严重的牛群中,建议淘汰所有RBT阳性牛;在感染率低或使用过疫苗的牛群中,需对RBT阳性血清进行更确定的确认试验(如补体结合试验) 。

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